技術(shù)文章
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細胞生物學(xué)研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領(lǐng)域經(jīng)常會進行細胞體外培養(yǎng),但是很多實驗員不知道該怎么選購細胞、細胞培養(yǎng)基、細胞培養(yǎng)試劑,本節(jié)小編帶你初步了解一下細胞系的選擇技巧、購買細胞培養(yǎng)基應(yīng)考慮的因素。一、細胞培養(yǎng)的環(huán)境條件細胞的體外培養(yǎng)需要為細胞創(chuàng)造良好的細胞的存活和增殖環(huán)境,這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和CO2水平、營養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。下表為大多數(shù)哺乳動物細胞的細胞培養(yǎng)的適宜條件。酸堿度7.0–7.4滲透壓280–320mmol/千克二氧化碳_5–10%溫度35–37°C二...
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我們知道開始培養(yǎng)的細胞不能無限期地生長,因為受限區(qū)域內(nèi)的細胞數(shù)量不斷增加,營養(yǎng)物質(zhì)也會被消耗,從而導(dǎo)致有毒的代謝產(chǎn)物增加,另外根據(jù)實驗或生產(chǎn)需要,也要對細胞進行擴大培養(yǎng)。通過去除培養(yǎng)基并將細胞轉(zhuǎn)移到新鮮的生長培養(yǎng)基和基質(zhì)中,細胞獲得了新鮮的營養(yǎng)并去除了有毒代謝物,從而可以長期維持培養(yǎng)。這個過程就屬于傳代培養(yǎng),傳代培養(yǎng)的細胞密度會低于原始培養(yǎng)物中的細胞密度。當(dāng)接種細胞后,細胞生長會經(jīng)過滯后期、對數(shù)期,穩(wěn)定期和凋亡期。在凋亡期,細胞會因缺乏營養(yǎng)或培養(yǎng)條件不當(dāng)而死亡。貼壁細胞傳代培...
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過濾器是生物安全柜的重要組成部分。了解過濾器的工作原理、維護級別以及過濾器需要多久更換一次,這些都是購買生物安全柜時需要考慮的因素。那么生物安全柜中的HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢?生物安全柜中使用的過濾器,一般為高效微粒空氣(HEPA)過濾器和超低滲透(ULPA)過濾器,HEPA和ULPA過濾器有什么區(qū)別呢?HEPA和ULPA過濾器的結(jié)構(gòu)及其工作原理從結(jié)構(gòu)和化學(xué)角度來說,HEPA和ULPA過濾器非常相似。這些過濾器用于生物安全柜,其中氣流(由電機驅(qū)動)攜帶有害氣體和顆...
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國產(chǎn)PCR儀購買時的注意事項PCR儀作為分子生物學(xué)相關(guān)實驗的常規(guī)儀器,每年都有數(shù)千臺的選購量,這兩年一批國產(chǎn)PCR儀正在興起。購買國產(chǎn)PCR儀需要考慮以下因素1樣本管的種類現(xiàn)在主要有0.2ml和0.5ml兩種,使用0.5mlPCR管的人員已經(jīng)很少了,一是0.5mlPCR專用的薄壁管很少見,二是如果想要較大體積的PCR產(chǎn)物,可以通過多分幾個0.2mlPCR管來實現(xiàn)。除非經(jīng)常需要較大體積的PCR產(chǎn)物,否則可以不必考慮0.5ml型的PCR儀。2樣本容量種類很多,0.2ml的有96孔...
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瓊脂糖凝膠電泳分子生物學(xué)常用的實驗方法,那么在凝膠電泳過程中需要注意哪些事項呢?一、切膠時的注意事項1.盡量保證電泳的buffer和gel都是新制的,切膠的臺子清理干凈,刀片也要洗凈,確保切下的沒有外源dna污染。2.為了減少膠的體積,可以用相對比較薄的膠來做,只要夠點樣即可,也可采用薄而寬的梳子來跑膠。3.關(guān)于防護,戴一般有機玻璃眼罩就足夠了,戴上防護面具也以保護眼睛,如果戴樹脂眼鏡就可以了。要是非常害怕紫外照射,或者對于膠有特殊要求,例如要求不含EB,可以采用點marke...
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