細(xì)胞生物學(xué)研究、創(chuàng)新藥開發(fā)等領(lǐng)域經(jīng)常會(huì)進(jìn)行細(xì)胞體外培養(yǎng),但是很多實(shí)驗(yàn)員不知道該怎么選購細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑,本節(jié)小編帶你初步了解一下細(xì)胞系的選擇技巧、購買細(xì)胞培養(yǎng)基應(yīng)考慮的因素。
一、細(xì)胞培養(yǎng)的環(huán)境條件
細(xì)胞的體外培養(yǎng)需要為細(xì)胞創(chuàng)造良好的細(xì)胞的存活和增殖環(huán)境,這樣的環(huán)境條件包括培養(yǎng)溫度、濕度和 CO 2水平、營養(yǎng)成分、酸堿度、滲透壓等。
下表為大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞培養(yǎng)的適宜條件。
酸堿度 7.0–7.4
滲透壓 280–320 mmol/千克
二氧化碳_ 5–10%
溫度 35–37°C
二、細(xì)胞系購買時(shí)應(yīng)考慮的因素
細(xì)胞系購買可以從相對(duì)完善的細(xì)胞庫或細(xì)胞供應(yīng)處進(jìn)行購買。蘇州阿爾法生物提供的常用細(xì)胞庫里的細(xì)胞株適用于基因編輯、新藥開發(fā)等領(lǐng)域。 細(xì)胞系的選擇需要考慮到細(xì)胞系的功能特點(diǎn)、生長速率、鋪板效率、生長條件和生長特征、克隆效率、培養(yǎng)方式等因素,如果您想高產(chǎn)量表達(dá)重組蛋白,您可以選擇可以懸浮生長的快速生長細(xì)胞系。
不同的細(xì)胞系其生長特點(diǎn)以及功能是不一樣的,比如:CHO細(xì)胞,HEK細(xì)胞,VRO細(xì)胞為哺乳動(dòng)物細(xì)胞多用于抗體開發(fā)、腫瘤研究、功能蛋白新藥開發(fā)等領(lǐng)域;成纖細(xì)胞由于細(xì)胞形態(tài)扁平、規(guī)則故多使用貼壁培養(yǎng)的方式進(jìn)行培養(yǎng),規(guī)模化擴(kuò)培可使用貼壁生物反應(yīng)器進(jìn)行培養(yǎng)。
三、細(xì)胞培養(yǎng)基購買應(yīng)考慮的因素
培養(yǎng)的細(xì)胞一般需要使用細(xì)胞培養(yǎng)基。配制細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)需要考慮四種關(guān)鍵成分,即:基礎(chǔ)培養(yǎng)基、谷氨酰胺、血清和抗生素。
1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 基礎(chǔ)培養(yǎng)基是營養(yǎng)物質(zhì)與鹽的混合物。常見的培養(yǎng)基有MEM、DMEM 和 RPMI培養(yǎng)基、F12培養(yǎng)基等。多數(shù)使用液體培養(yǎng)基。
2.谷氨酰胺 谷氨酰胺是細(xì)胞生長所必需的必需氨基酸。可以購買含有谷氨酰胺、不含谷氨酰胺或含有穩(wěn)定的二肽谷氨酰胺替代品的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。重要的是要確保您的培養(yǎng)物在正常生長條件下含有谷氨酰胺。
3.動(dòng)物血清 細(xì)胞通常在補(bǔ)充有動(dòng)物血清的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中生長。這被稱為“完整"介質(zhì)。血清為細(xì)胞提供所需的生長因子和營養(yǎng)素。胎牛(胎牛)血清是常用的。血清目前主要有澳洲胎牛血清、美洲胎牛血清和國產(chǎn)胎牛血清等。在大多數(shù)情況下,選擇有的培養(yǎng)基已添加血清無需單獨(dú)購買。
4.抗生素 細(xì)胞培養(yǎng)基通常補(bǔ)充有青霉素和鏈霉素的抗生素組合,作為防止細(xì)菌生長的措施。使用無菌技術(shù),可以在不使用抗生素的情況下培養(yǎng)健康的細(xì)胞培養(yǎng)物。
蘇州阿爾法的HEK293/VERO等細(xì)胞株,同時(shí)提供血清、培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)基、細(xì)胞培養(yǎng)試劑以及細(xì)胞培養(yǎng)耗材、細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備等廣泛應(yīng)用于生物制藥、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域,更多實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備、試劑耗材進(jìn)入蘇州阿爾法生物了解。