大腸桿菌分離用什么培養(yǎng)基

培養(yǎng)基作為細(xì)胞的“食物”，是細(xì)胞培養(yǎng)和發(fā)酵的基礎(chǔ)，大腸桿菌在不同的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可能會(huì)表現(xiàn)出不同的性狀，而利用這些性狀的不同，可將部分菌種進(jìn)行區(qū)分或分離，此外，根據(jù)目標(biāo)菌種選擇合適的培養(yǎng)基可以低成本、穩(wěn)定的高表達(dá)。大腸桿菌分離培養(yǎng)基常見的主要有以下幾種：大腸桿菌分離培養(yǎng)基：主要根據(jù)不同的大腸桿菌在培養(yǎng)基中的生產(chǎn)速度，代謝產(chǎn)物，對(duì)培養(yǎng)基中特定組分的需求利用情況不同等實(shí)現(xiàn)對(duì)不同種類的菌種進(jìn)行分離或篩選。LB固體培養(yǎng)基：是一種主要組分為酵母提取物、胰化蛋白胨、NaCl瓊脂的非選擇性固...

查看更多

發(fā)酵工程培養(yǎng)基有哪些

發(fā)酵工程培養(yǎng)基主要使用發(fā)酵培養(yǎng)基：發(fā)酵培養(yǎng)基是指為了在生產(chǎn)中更加利于菌種代謝產(chǎn)物的生成而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基，這類培養(yǎng)基常見的主要有以下幾種：SOB（SuperOptimalBroth）培養(yǎng)基：是一種富營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基，其配方為：2%胰蛋白胨,0.5%酵母提取物,10mMNaCl,2.5mMKCl,10mMMgCl2,10mMMgSO4。與LB培養(yǎng)基相比，SOB培養(yǎng)基中含有兩倍多的蛋白胨，富含更多的氨基酸及多肽。此外，SOB培養(yǎng)基中含有鎂離子，鎂離子是高密度培養(yǎng)必須的離子。利用SOB培養(yǎng)基...

查看更多

流式細(xì)胞技術(shù)介紹

流式細(xì)胞技術(shù)是一項(xiàng)廣為使用、基于激光的生物學(xué)技術(shù)，利用流式細(xì)胞儀對(duì)處于快速流動(dòng)的熒光染色的細(xì)胞或生物顆粒進(jìn)行多參數(shù)、快速的定量分析和分選，是當(dāng)代主要的細(xì)胞定量分析技術(shù)之一。主要有以下幾個(gè)特點(diǎn)：1.只要樣本制成單個(gè)細(xì)胞或生物顆粒懸液均可以分析。2.測(cè)量速度快，每秒鐘可以測(cè)量數(shù)千個(gè)乃至數(shù)萬個(gè)細(xì)胞3.同時(shí)測(cè)量每個(gè)細(xì)胞的多參數(shù)特征。4.在進(jìn)行細(xì)胞特征分析的同時(shí)可以把有特征細(xì)胞分離出來(分選技術(shù))關(guān)于流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀由三部分構(gòu)成——1.液流系統(tǒng)，包括流動(dòng)室和液流驅(qū)動(dòng)系統(tǒng)；2.光學(xué)系...

查看更多

Transwell實(shí)驗(yàn)的步驟

本文主要介紹4種Transwell實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)步驟，具體包括：Transwell腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、Transwell上皮細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、TranswellB16細(xì)胞的體外遷移實(shí)驗(yàn)、Transwell內(nèi)皮細(xì)胞HMEC-1遷移實(shí)驗(yàn)。一、Transwell腫瘤細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)過程與Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)基本一致，不同的只是不需要鋪Matrigel。由于沒有基質(zhì)膠的阻擋，細(xì)胞穿過膜的速度較侵襲實(shí)驗(yàn)明顯加快，所以細(xì)胞量要更大。我做侵襲實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞密度是1×10°，而遷移實(shí)驗(yàn)的密度是1×10°...

查看更多

重組蛋白表達(dá)技術(shù)要點(diǎn)

大腸桿菌（E.coli）表達(dá)重組蛋白的技術(shù)經(jīng)過多年的發(fā)展，已經(jīng)成為一個(gè)非常成熟表達(dá)系統(tǒng)。為了在大腸桿菌表達(dá)體系中獲得可溶以高表達(dá)產(chǎn)量的蛋白，一個(gè)優(yōu)秀的表達(dá)策略是重要的。為了高效表達(dá)有活性蛋白，一般需考慮以下幾個(gè)因素：1.宿主體系的選擇細(xì)菌、酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞、絲狀真菌和單細(xì)胞藻類均可以作為表達(dá)宿主，每一種表達(dá)宿主都有各自的優(yōu)缺點(diǎn)。如果需要表達(dá)的蛋白具有真核的翻譯后修飾（糖基化修飾），那么可以選擇酵母、哺乳動(dòng)物細(xì)胞等，而大腸桿菌等原核表達(dá)體系則不適用。大腸桿菌作為表達(dá)外源蛋白廣...

查看更多