Step 1：將含病毒的核酸序列的質(zhì)粒，注入到大腸桿菌中，這里的質(zhì)?？梢允菑牟《局刑崛?，但更安全有效的方法是根據(jù)發(fā)表的核酸序列優(yōu)化設(shè)計直接連接到質(zhì)粒上，避免跟病毒直接接觸；
Step 2：在溫暖適宜的條件下，大量繁殖生長攜帶了質(zhì)粒的大腸桿菌；
Step 3：將上述生長繁殖的大腸桿菌轉(zhuǎn)移至體積更大的營養(yǎng)液里，適宜條件下存放發(fā)酵，使其復(fù)制億萬級別的質(zhì)粒；
Step 4：發(fā)酵結(jié)束后，加入酶或者其他化學(xué)物質(zhì)分解大腸桿菌細(xì)胞壁，收集并純化質(zhì)粒；
Step 5：檢測上述的質(zhì)粒，確保質(zhì)粒攜帶的基因序列未發(fā)生變異，能夠用于后續(xù)的疫苗生產(chǎn)；
Step 6：加入限制性核酸內(nèi)切酶，從環(huán)狀的質(zhì)粒中切割出直線段的病毒基因，并除去殘留的細(xì)菌和質(zhì)粒片段；
Step 7：根據(jù)“中心法則"，以DNA為模板轉(zhuǎn)錄成mRNA；mRNA進(jìn)入人體，其攜帶的病毒基因即可在體內(nèi)翻譯出病毒蛋白，即為抗體，用于中和病毒；mRNA也需進(jìn)行質(zhì)量中控，確保能用于后續(xù)的疫苗生產(chǎn)；
Step 8：準(zhǔn)備脂質(zhì)，用于保護(hù)mRNA進(jìn)入體內(nèi)時不會被破壞；
Step 9：精確的控制著mRNA和脂質(zhì)流速，將他們混合成脂質(zhì)納米粒。
具體生產(chǎn)步驟如下：
步驟一：從冷庫中提取DNA
第一步生產(chǎn)人員會從主細(xì)胞庫中提取RNA/dna，提取后的DNA會被技術(shù)人員提取后保存在-150℃的小實驗瓶中。之后技術(shù)人員將會把解凍了的質(zhì)粒注入進(jìn)一批已經(jīng)做了人工調(diào)整了的大腸桿菌里，從而使大腸桿菌把質(zhì)粒帶入自己細(xì)胞里。通常情況下一小瓶裝滿質(zhì)粒的實驗瓶能夠用來生產(chǎn)5000萬劑疫苗。
步驟二：成長繁殖
涵蓋了大腸桿菌以及質(zhì)粒的溶液將會被裝在實驗瓶中，并且在一種溫暖無菌的琥珀色生長培養(yǎng)基中生長與繁殖。
步驟三：發(fā)酵混合物（細(xì)菌）
以上提到的細(xì)菌會被給予一晚的時間進(jìn)行生長繁殖，然后會被轉(zhuǎn)移至營養(yǎng)液中存放四天，進(jìn)行細(xì)菌繁殖和DNA復(fù)制。
步驟四：凈化并采集DNA
發(fā)酵過程在經(jīng)歷了四天后，研究人員將會往里注入一種化學(xué)物質(zhì)來分解細(xì)菌的細(xì)胞壁，隨后會凈化混合物，并且最終提取到僅留的質(zhì)粒。分解細(xì)胞壁——凈化提取質(zhì)粒
步驟五：質(zhì)量檢測
被提取出來的質(zhì)粒將會被技術(shù)人員通過和之前的樣品進(jìn)行對比，以確認(rèn)剛剛生產(chǎn)的質(zhì)粒的病毒基因序列能夠被用于生產(chǎn)疫苗。
步驟六：質(zhì)粒線性化
質(zhì)粒通過質(zhì)檢后，技術(shù)人員將會加入酵素進(jìn)行環(huán)狀質(zhì)粒切割，把病毒基因從環(huán)狀狀態(tài)切割成直線段。
步驟七：純化DNA
技術(shù)人員將會將純度已經(jīng)較高的混合物進(jìn)行再一次純化，用于濾出殘留的細(xì)菌或質(zhì)粒片段。
步驟八：運輸
在運輸前每瓶DNA都會被冷凍、裝袋、密封，然后被放入一個裝有足夠干冰的容器里，這些容器將會被轉(zhuǎn)運到另一家工廠進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。
步驟九：進(jìn)行DNA到mRNA的轉(zhuǎn)變（體外轉(zhuǎn)錄IVT）
轉(zhuǎn)運過來的DNA將會先進(jìn)行解凍然后摻入由mRNA組成的部分混合，隨后酵素將會撬開DNA模板并轉(zhuǎn)化其成為mRNA。之后得到的混合物將會被移入到一個儲罐里，并且通過過濾去除雜質(zhì)。
步驟十：mRNA檢測
過濾后的mRNA將會被反復(fù)測試以確保其出精度以及基因序列是否準(zhǔn)確。
步驟十一：冷藏、打包和再次運輸
檢測后的mRNA包冷凍到零下20度，然后運到工廠。將會在那里做成疫苗，然后再把樣本運回來檢測。
步驟十二：準(zhǔn)備mRNA
收到mRNA的包裹后，保持冷凍直到需要用時，每個包能個制造60萬瓶，360萬劑的疫苗。
步驟十三：脂質(zhì)納米粒遞送系統(tǒng)制備（LNP）
同時，另一個步驟也在進(jìn)行，準(zhǔn)備脂質(zhì)納米?！@種物質(zhì)能保護(hù)mRNA進(jìn)入人體細(xì)胞時不會被破壞。
步驟十四：制作mRNA疫苗
準(zhǔn)備好之后，通過機(jī)器精確控制mRNA和脂質(zhì)，將他們混合成脂質(zhì)納米粒，形成疫苗顆粒。
步驟十五：準(zhǔn)備疫苗瓶
清洗和高溫消毒疫苗瓶，13部高速攝像機(jī)在盯著流水線，每一個瓶子都要拍超過100張照片，有裂縫、碎片和其他問題的瓶子，將會迅速從生產(chǎn)線篩選出去。
步驟十六：罐裝疫苗
機(jī)器將0.45毫升疫苗注射到一個瓶子，稀釋后，成為6個劑量的疫苗。生產(chǎn)線每分鐘能包裝575個瓶子。
步驟十七：打包、冷藏和測試
灌注完的疫苗經(jīng)過檢查，貼上標(biāo)簽，然后放進(jìn)盒子里打包。所有盒子要再冷凍數(shù)天，降溫到零下70℃的極冷溫度。與此同時，該批次的疫苗要送去做檢測。
步驟十八：打包和運輸成品疫苗
數(shù)周的測試后，合格的疫苗可以運輸了。盒子里裝上了溫度計，實時監(jiān)測溫度是否達(dá)標(biāo)。每個盒子里有45磅的干冰。
