移液器的校準(zhǔn)，意味著確定分配體積和選定體積之間的差異。移液器校準(zhǔn)是指通過校對(duì)調(diào)整移液器，使分配的體積在一定的規(guī)格范圍內(nèi)。工廠校準(zhǔn)期間，可以通過不同的稱量在量程的MAX體積和MIN或MAX體積的 10%（以較高者為準(zhǔn)）檢查性能。當(dāng)您購(gòu)買移液器時(shí)，您應(yīng)該選擇一款能夠針對(duì)不同溫度和各種粘性液體進(jìn)行重新校準(zhǔn)和調(diào)整的移液器。
在質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器
質(zhì)量系統(tǒng)中移液器校準(zhǔn)的主要目標(biāo)是確保以預(yù)期的精度進(jìn)行測(cè)量。誤差限制通常來自制造商的規(guī)格，而執(zhí)行工作所需的精度要低得多。移液器的校準(zhǔn)實(shí)質(zhì)是根據(jù)*標(biāo)準(zhǔn)（DIN 12650 或 ISO 8655）設(shè)置限制。根據(jù)質(zhì)量體系中校準(zhǔn)移液器的程序如下：
一、設(shè)備要求和測(cè)試條件
1.平衡度測(cè)定：
天平的刻度值應(yīng)根據(jù)所選的移液器體積來選擇。
注意：使用已知砝碼定期檢查您的天平校準(zhǔn)情況。
2.測(cè)試液體要求：
蒸餾水或去離子水，“3 級(jí)"，符合 ISO 3696。測(cè)試水在校準(zhǔn)前至少在校準(zhǔn)室中放置 2 小時(shí)，以達(dá)到與測(cè)試室條件的平衡。測(cè)試室條件要求：
3.測(cè)試在 20C 至 25C 的恒定 (+/- 0.5C) 溫度下在無氣流的房間中進(jìn)行。建議相對(duì)濕度在 45% 以上。尤其是體積在 50 vl 以下的情況下，空氣濕度應(yīng)盡可能高，以減少蒸發(fā)損失的影響。
- 測(cè)試室內(nèi)的移液器、水和空氣應(yīng)處于相同溫度。
- 新吸頭應(yīng)預(yù)先潤(rùn)濕 1 至 3 次以提高準(zhǔn)確性。
- 始終從水箱中吸取水，不要從天平中取回水。
- 根據(jù)使用頻率和應(yīng)用情況定期檢查校準(zhǔn)，但至少每年一次。如果每天使用，建議間隔三個(gè)月。
1.收到需要校準(zhǔn)的移液器后，每個(gè)移液器都小心地打開包裝并檢查是否有任何可見的損壞跡象。發(fā)現(xiàn)的任何可見損壞都會(huì)立即報(bào)告給客戶。客戶將被告知損壞是否可以修復(fù)以及將收取哪些額外費(fèi)用?？蛻魧l(fā)出新的工作訂單以支付維修費(fèi)用。
2.對(duì)每個(gè)移液器進(jìn)行輻射污染掃描。發(fā)現(xiàn)的任何輻射污染都會(huì)立即報(bào)告給客戶，并且移液器將被拒絕校準(zhǔn)。
3.所有客戶的移液器都經(jīng)過計(jì)數(shù)，并與提供的工作訂單上報(bào)告的數(shù)量進(jìn)行比較。任何數(shù)量差異都會(huì)立即報(bào)告給客戶?？蛻魧⒂袡C(jī)會(huì)找到任何缺失的數(shù)量，否則工作訂單將需要修改并由客戶簽署。
4.每個(gè)工作訂單將被放置在一個(gè)單獨(dú)的內(nèi)部存儲(chǔ)箱中，直到計(jì)劃進(jìn)行校準(zhǔn)。
為每個(gè)工作訂單分配單獨(dú)的工作 ID 號(hào)。
6.檢查客戶信息與存檔信息的任何差異，并在需要時(shí)進(jìn)行更正。所有移液器都在分配的作業(yè) ID 號(hào)下輸入 Cal Lab 數(shù)據(jù)庫(kù)，并為每個(gè)儀器分配 ID 號(hào)。
三、預(yù)校準(zhǔn)程序
· 在校準(zhǔn)和任何移液器調(diào)整之前獲得和記錄的數(shù)據(jù)也將被記錄下來。
· 每個(gè)移液器都將在制造商定的MIN和MAX量程點(diǎn)進(jìn)行測(cè)試。每個(gè)點(diǎn)進(jìn)行十次測(cè)試。
· 作為預(yù)防性維護(hù)的一部分，每個(gè)移液器都根據(jù)制造商的圖表進(jìn)行拆卸，并用適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)溶液清潔。
· 所有零件都經(jīng)過仔細(xì)檢查，活塞在大多數(shù)情況下都經(jīng)過拋光，活塞密封和 O 形圈以及所有有缺陷和故障的零件都已更換。完成后，將根據(jù)制造商的圖表和程序重新組裝每個(gè)移液器。再次目視檢查移液器的功能是否正常。
四、移液器校準(zhǔn)步驟
1.在移液器校準(zhǔn)開始時(shí)，每個(gè)移液器在進(jìn)行任何調(diào)整之前都會(huì)預(yù)先檢查 3 次。如果移液器失敗，將執(zhí)行適當(dāng)?shù)男?zhǔn)調(diào)整。校正后，每臺(tái)儀器將在低和高量程點(diǎn)進(jìn)行校準(zhǔn)，每個(gè)測(cè)試點(diǎn)進(jìn)行10 次測(cè)試。
2.校準(zhǔn)數(shù)據(jù)將被記錄并報(bào)告在校準(zhǔn)報(bào)告中。
3.為每個(gè)移液器發(fā)布校準(zhǔn)報(bào)告以及整個(gè)工作的校準(zhǔn)摘要。適當(dāng)?shù)募夹g(shù)人員簽署報(bào)告。
創(chuàng)建校準(zhǔn)標(biāo)簽并貼在每個(gè)移液器上。所有移液器都經(jīng)過交叉核對(duì)客戶提供的文書工作以及實(shí)驗(yàn)室內(nèi)創(chuàng)建的文檔。
4.QC 主管檢查隨機(jī)選擇的移液器的整體性能。
5.如果檢測(cè)到任何錯(cuò)誤，則將整個(gè) Job 送回以進(jìn)行重新檢查。
6.QC 主管批準(zhǔn)工作，移液器經(jīng)過仔細(xì)包裝并隨附所有校準(zhǔn)文檔交付給客戶。
移液器誤差的來源：
l 揮發(fā)性液體蒸發(fā)。在飽和空氣中使用。
l 高密度液體下沉。改變技術(shù)。
l 粘性液體會(huì)粘在末端。改變技術(shù)。
l 親水吸頭將保留液體。預(yù)濕筆尖。
l 浸入式吸頭攜帶液體。浸入 2-3 毫米。
l 有角度的移液器會(huì)吸收更多的液體。保持垂直。
l 表面張力會(huì)降低精度。改變技術(shù)。
l 冷熱液體。在室溫下吸取液體。
l 人的因素。練習(xí)和觀察技術(shù)。
五、移液器校準(zhǔn)計(jì)算公式：
質(zhì)量到體積的轉(zhuǎn)換
V = (w + e) x Z
V = 體積 (vl)
w = 重量（毫克）
e = 蒸發(fā)損失 (mg)
Z = mg/vl 轉(zhuǎn)換的轉(zhuǎn)換系數(shù)
注意：蒸發(fā)損失可能在體積小時(shí)明顯。要確定質(zhì)量損失，請(qǐng)將水分配到稱量容器中，記下讀數(shù)并開始用秒表計(jì)時(shí)。檢查讀數(shù)在 5 秒內(nèi)下降了多少。將此與移液時(shí)間進(jìn)行比較。通常，移液時(shí)間可能為 5 秒，質(zhì)量損失高達(dá) 2 mg。如果在容器上使用蒸發(fā)阱或蓋子，則無需進(jìn)行蒸發(fā)校正。
換算系數(shù) Z 用于計(jì)算在測(cè)試溫度和壓力下懸浮在空氣中的水的密度。請(qǐng)參見第 15 頁(yè)的轉(zhuǎn)換表 1。
準(zhǔn)確度（系統(tǒng)誤差）
準(zhǔn)確度是移液器的分配體積和選定體積之間的差異。
精度在移液器校準(zhǔn)證書上以相對(duì)值表示：
精密度（隨機(jī)誤差）
精密度是指移液的可重復(fù)性。它表示為標(biāo)準(zhǔn)偏差 (s) 或變異系數(shù) (cv)。除了移液器的特性外，實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐和用戶體驗(yàn)是影響精度的主要因素。
根據(jù) DIN 12650 的誤差（F 值）
DIN 標(biāo)準(zhǔn)沒有給出準(zhǔn)確度和精密度的單獨(dú)限制，而是使用組合誤差限制：F 值。
F = | 一個(gè) | + 2 xs
計(jì)算相對(duì) F 值：
F% = | % | + 2 x 數(shù)量
表 2 顯示了根據(jù) DIN 12650 標(biāo)準(zhǔn)對(duì)單通道空氣置換移液器的誤差限制。對(duì)于多道移液器，這些限制加倍。對(duì)于可變?nèi)萘恳埔浩?，?biāo)稱容量是最大容量。標(biāo)稱體積的絕對(duì) vl 限制適用于整個(gè)體積范圍內(nèi)的每個(gè)選定體積。
例如，對(duì)于 20-200UL的移液槍，每個(gè)選定體積的誤差限制為2.0ul。如果移液器的標(biāo)稱體積介于表中的數(shù)值之間，則使用接近體積的相對(duì)誤差限值 F%。如果標(biāo)稱體積正好在表 2 中的兩個(gè)體積之間，則使用較低體積的相對(duì)誤差限值 F%。
移液器精密度和準(zhǔn)確度的評(píng)估
無差錯(cuò)移液需要精密度和準(zhǔn)確度。許多因素會(huì)影響這些規(guī)格，它們是評(píng)估移液器性能的主要定量參數(shù)。
例如當(dāng)設(shè)置體積為 20 vl 時(shí)：準(zhǔn)確但不精確：平均體積是正確（設(shè)定）體積，但單獨(dú)移液與設(shè)定體積不同。
精確，但不準(zhǔn)確：?jiǎn)为?dú)移液之間沒有變化，但平均體積與設(shè)定體積不同。
準(zhǔn)確和精確：平均體積是設(shè)定的體積，不同移液之間沒有差異。
1. 移液器垂直，吸頭浸入液體約 1 cm。
2. 移液器垂直，吸頭浸入液體約 3 cm。
3. 30×40度角移液器；末端浸入液體中約 3-4 厘米。
梅特勒-瑞寧作為專業(yè)的移液器生產(chǎn)供應(yīng)商，為生物科學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供移液解決方案，除了移液器供應(yīng)和專業(yè)的移液器 校準(zhǔn) 、售后服務(wù)，產(chǎn)品也在不斷升級(jí)推新，多年來與蘇州阿爾法生物合作密切，所開發(fā)的 LTS輕觸式去吸頭移液器符合人體力學(xué)工程設(shè)計(jì)，在保證移液器精確度的同時(shí)，也減輕了重復(fù)操作移液器所帶來的疲勞，有效提升液體處理效率。
