熒光定量 PCR 中無 Ct 值或 Ct值過晚,該如何解決？

在熒光定量PCR實驗里，無Ct值出現(xiàn)和Ct值過晚是常讓科研人員頭疼的問題。這些問題會嚴重干擾實驗結果的準確性與可靠性，接下來我們就深入探討下背后的原因和解決辦法。一、無Ct值出現(xiàn)的原因及解決辦法（一）循環(huán)數(shù)設置不合理正常情況下，PCR循環(huán)數(shù)一般不宜超過45循環(huán)。要是循環(huán)數(shù)設置不夠，可能因擴增產(chǎn)物量不夠，熒光信號沒達到可檢測水平，導致無Ct值。比如在一些低拷貝數(shù)模板的檢測中，若循環(huán)數(shù)只設30次，很可能就檢測不到產(chǎn)物。解決辦法：依據(jù)實驗經(jīng)驗和模板預估量，合理增加循環(huán)數(shù)，不過要注意...

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梯度 PCR 儀怎么選？基因工程實驗高效工具科普

朋友們，在基因工程相關實驗里，PCR儀可是常用又關鍵的設備，像梯度PCR儀、熒光定量PCR儀，不同類型功能大不同，今天就結合基因工程知識，聊聊這類儀器，還會講講朗基PCR儀的實用特點～先復習下基因工程基礎概念！生物技術里，基因工程、蛋白質工程這些是重要分支；遺傳工程廣義包含染色體工程、基因工程等，狹義就是基因工程，而重組DNA技術是基因工程核心，克隆則是無性繁殖產(chǎn)生后代或相同遺傳性狀群體?；蚬こ踢^程分上游和下游技術，上游是基因重組、克隆和表達設計構建，下游涉及工程菌大規(guī)模培...

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分子動力分析為什么離不開分析互作儀

一、動力學分析的核心需求:捕捉動態(tài)相互作用動力學分析的本質是研究分子、細胞或系統(tǒng)在時間維度上的行為變化，例如藥物與靶標蛋白的結合速率、蛋白質折疊路徑、病毒與宿主受體的識別過程等。這類研究需要實時監(jiān)測分子間相互作用的動態(tài)參數(shù)，如結合常數(shù)（Kd）、解離速率（koff）、結合速率（kon）等，而這些參數(shù)直接決定了生物過程的效率與機制。傳統(tǒng)實驗方法（如熒光標記、放射性同位素法）存在標記干擾、耗時長、通量低等缺陷，難以滿足復雜動態(tài)系統(tǒng)的分析需求。而分子互作儀通過無標記、實時監(jiān)測的技術特...

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以下是臺式生物反應器加工、制造工藝的詳細解析

以下是對臺式生物反應器加工、制造工藝的詳細解析：一、材料準備1.材料選擇容器材質：根據(jù)生物反應的要求，臺式生物反應器的容器部分通常采用不銹鋼（如316L）或高性能塑料（如聚碳酸酯、聚丙烯）。不銹鋼具有良好的耐腐蝕性、機械強度和良好的熱傳導性能，適用于大多數(shù)生物反應環(huán)境，尤其是需要高溫滅菌或涉及腐蝕性介質的反應。高性能塑料則具有成本低、重量輕、化學穩(wěn)定性好等優(yōu)點，適合一些對溫度和壓力要求不特別高的生物反應。密封材料：密封材料的選擇至關重要，因為它直接影響反應器的密封性能和生物安...

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限制性內切酶是怎么被命名的？

大家好！歡迎來到今天的科學小課堂。在分子生物學的實驗室里，有一種能精準切割DNA的"基因手術刀"，叫限制性內切酶。但HindⅢ、EcoRI這些復雜名字總讓人摸不著頭腦，它們的命名其實藏著一套科學又有趣的規(guī)則，今天咱們就來拆解這些"分子剪刀"的身份密碼。故事要從20世紀70年代說起。1973年，美國科學家H.D.Smith和D.Nathans在研究流感嗜血桿菌時，提出了酶命名的基本框架，就像給酶發(fā)放了第一張卡片。隨著基因工程發(fā)展，1980年R.J.Roberts完善了這套規(guī)則，...

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