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使用G418篩選HEK-293T細(xì)胞的詳細(xì)步驟1.細(xì)胞培養(yǎng):復(fù)蘇HEK-293T細(xì)胞,用合適的培養(yǎng)基(如DMEM高糖培養(yǎng)基,含10%胎牛血清等)在37℃、5%CO?培養(yǎng)箱中培養(yǎng),待細(xì)胞匯合度達(dá)80%-90%時(shí)進(jìn)行傳代或轉(zhuǎn)染操作。2.確定G418篩選濃度:如客戶所做,在96孔板中接種細(xì)胞,設(shè)置0-1100μg/mL的G418濃度梯度,用CCK8檢測(cè)培養(yǎng)24小時(shí)的細(xì)胞活性,繪制細(xì)胞活力圖,確定HEK-293T細(xì)胞的G418最小致死量。3.轉(zhuǎn)染:將目的基因連接到pCDNA3.1載體...
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梯度PCR擴(kuò)增儀是一種用于進(jìn)行梯度PCR實(shí)驗(yàn)的儀器,它能夠在同一個(gè)反應(yīng)體系中同時(shí)進(jìn)行多個(gè)不同溫度下的PCR反應(yīng)。以下是對(duì)梯度PCR擴(kuò)增儀作用的介紹:1.優(yōu)化PCR反應(yīng)條件:通過(guò)設(shè)置不同的退火溫度,PCR擴(kuò)增儀可以快速確定最佳的PCR反應(yīng)條件,這對(duì)于復(fù)雜的基因片段擴(kuò)增、低基因拷貝數(shù)的目標(biāo)序列擴(kuò)增以及特定結(jié)果的需求非常有用。2.提高實(shí)驗(yàn)效率:PCR擴(kuò)增儀可以同時(shí)進(jìn)行多個(gè)溫度下的PCR反應(yīng),從而大大縮短了實(shí)驗(yàn)時(shí)間,提高了實(shí)驗(yàn)效率。3.節(jié)省實(shí)驗(yàn)成本:使用PCR擴(kuò)增儀可以減少不必要的重...
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梯度PCR擴(kuò)增儀是一種在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中廣泛使用的設(shè)備,它通過(guò)引入一組梯度溫度來(lái)優(yōu)化PCR反應(yīng)條件,從而提高擴(kuò)增效率和準(zhǔn)確性。以下是對(duì)梯度PCR擴(kuò)增儀的安全性能進(jìn)行的分析:1.溫度控制PCR擴(kuò)增儀能夠精確控制反應(yīng)體系的溫度變化,這是其核心功能之一。通過(guò)在不同溫度下進(jìn)行擴(kuò)增,可以篩選出適合目標(biāo)DNA擴(kuò)增的溫度條件,從而提高擴(kuò)增效率和特異性。2.自動(dòng)化操作梯度PCR擴(kuò)增儀的操作相對(duì)簡(jiǎn)單,只需將試管放入反應(yīng)槽中,設(shè)置不同的梯度溫度即可。這種自動(dòng)化程度高的操作減少了人為錯(cuò)誤的可能性,...
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MillicellERS-3.0數(shù)字細(xì)胞電阻儀在藥物研發(fā)領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用,以下為您介紹一些成功案例:一、黃諾馬苷在MDCK單層細(xì)胞模型上的轉(zhuǎn)運(yùn)機(jī)制分析研究目的:研究黃諾馬苷在馬丁達(dá)比犬腎上皮(MDCK)單層細(xì)胞模型上的吸收轉(zhuǎn)運(yùn)特性。實(shí)驗(yàn)方法:利用噻唑藍(lán)(MTT)比色法考察黃諾馬苷對(duì)MDCK細(xì)胞的毒性,使用Millicell-ERS-2型細(xì)胞電阻儀檢測(cè)MDCK單層細(xì)胞模型的電阻值,考察黃諾馬苷的質(zhì)量濃度、給藥時(shí)間以及鈉-葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(SGLTs)抑制劑和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2...
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MillicellERS-3.0數(shù)字細(xì)胞電阻儀在不同領(lǐng)域中發(fā)揮著重要作用,其技術(shù)參數(shù)對(duì)應(yīng)用的影響也比較重要。以下將詳細(xì)闡述技術(shù)參數(shù)如何影響該儀器在不同領(lǐng)域的應(yīng)用。一、MillicellERS-3.0數(shù)字細(xì)胞電阻儀的主要技術(shù)參數(shù)MillicellERS-3.0數(shù)字細(xì)胞電阻儀通常具有以下主要技術(shù)參數(shù):測(cè)量范圍:能夠測(cè)量不同細(xì)胞模型的電阻值范圍,這決定了它可以應(yīng)用于各種類(lèi)型的細(xì)胞屏障研究。例如,對(duì)于血腦屏障等緊密連接較為復(fù)雜的細(xì)胞模型,需要能夠準(zhǔn)確測(cè)量較大范圍電阻值的儀器。精度:高...
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