在生物制藥領(lǐng)域，CHO（中國倉鼠卵巢）細胞是常用的宿主細胞，用于生產(chǎn)重組蛋白藥物。然而，在CHO細胞的培養(yǎng)過程中，有時會遇到細胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不佳的問題。這種情況可能會影響藥物的生產(chǎn)效率和產(chǎn)品質(zhì)量。本文將分析可能導致 CHO細胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不佳的原因，并提出相應(yīng)的解決方案。
CHO細胞轉(zhuǎn)瓶后長勢不好的原因主要有以下幾點：
1.環(huán)境變化：細胞在轉(zhuǎn)瓶過程中，可能會遇到溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度等環(huán)境因素的變化。這些變化可能會對細胞的生長狀態(tài)產(chǎn)生影響。例如，溫度的波動可能導致細胞代謝途徑的改變，濕度的變化可能會影響細胞的滲透壓平衡，氧氣和二氧化碳濃度的波動可能會影響細胞的呼吸和酸堿平衡。因此，維持穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境對于細胞的生長比較重要。
2.營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足：轉(zhuǎn)瓶后，細胞可能會面臨營養(yǎng)物質(zhì)供應(yīng)不足的問題。尤其是葡萄糖、氨基酸和維生素等關(guān)鍵營養(yǎng)素的缺乏，可能會導致細胞能量供應(yīng)不足，影響細胞的生長和代謝。因此，在轉(zhuǎn)瓶后，需要及時補充足夠的營養(yǎng)物質(zhì)，以滿足細胞的生長需求。
3.代謝廢物積累：細胞代謝產(chǎn)生的廢物，如乳酸和氨，如果在轉(zhuǎn)瓶后不能及時清除，可能會對細胞生長產(chǎn)生不利影響。這些廢物積累過多會導致細胞內(nèi)環(huán)境惡化，影響細胞的生長和生產(chǎn)力。因此，定期更換培養(yǎng)基，及時清除代謝廢物，可以使細胞維持良好的生長狀態(tài)。
4.細胞密度和競爭：轉(zhuǎn)瓶后，細胞密度可能會增加，導致細胞間的競爭加劇。過高的細胞密度可能會導致營養(yǎng)物質(zhì)的消耗過快，代謝廢物的積累增多，以及細胞間的接觸抑制現(xiàn)象。這些因素都會影響細胞的生長和生產(chǎn)力。因此，在轉(zhuǎn)瓶前，需要控制細胞的密度，避免過高的細胞密度對生長產(chǎn)生不利影響。
5.無菌條件：轉(zhuǎn)瓶過程中的無菌操作不當可能會導致細胞污染。細胞污染會嚴重影響細胞的生長狀態(tài)，甚至導致細胞死亡。因此，在轉(zhuǎn)瓶過程中，需要嚴格遵守無菌操作規(guī)程，包括對培養(yǎng)器具的消毒、操作人員的無菌操作技術(shù)等，以防止細胞污染的發(fā)生。
轉(zhuǎn)瓶后細胞長勢弱的優(yōu)化解決方案：
1. 優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境：確保轉(zhuǎn)瓶后的培養(yǎng)環(huán)境（如溫度、濕度、氧氣和二氧化碳濃度）與原培養(yǎng)環(huán)境一致，減少環(huán)境變化對細胞的影響。
2. 調(diào)整培養(yǎng)基配方：根據(jù)細胞的營養(yǎng)需求，調(diào)整培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分，確保細胞在轉(zhuǎn)瓶后能夠獲得充足的營養(yǎng)供應(yīng)。
3. 定期更換培養(yǎng)基：定期更換培養(yǎng)基，以清除代謝廢物，保持培養(yǎng)環(huán)境的穩(wěn)定。
4. 控制細胞密度：在轉(zhuǎn)瓶前，控制細胞的密度，避免過高的細胞密度對生長產(chǎn)生不利影響。
5. 加強無菌操作：在轉(zhuǎn)瓶過程中，嚴格遵守無菌操作規(guī)程，防止細胞污染。
此外，可以使用一些商業(yè)化的添加劑和設(shè)備來促進CHO細胞的生長，如使用InstiGRO、InstiSHAKE和InstiTHAW等促細胞生長劑。
- InstiGRO：這是一種促進CHO或HEK單細胞生長的添加劑，可以提高克隆效率，加速手動鋪板后細胞的生長。與Solentim VIPS系統(tǒng)結(jié)合使用，可以實現(xiàn)自動單細胞鋪板，從而提高細胞株開發(fā)的效率。
- InstiSHAKE：這是一種專為CHO或HEK細胞設(shè)計的振蕩培養(yǎng)補充劑，可以提高細胞活力，加速細胞生長，有助于生產(chǎn)更高密度的培養(yǎng)物，并在一系列培養(yǎng)基中提供批次間的一致性。
- InstiTHAW：這是一種用于冷凍保存細胞的添加劑，旨在保護CHO或HEK細胞在冷凍和解凍過程中的活力，確保細胞在冷凍保存后獲得理想的恢復率。
當CHO細胞在轉(zhuǎn)瓶后出現(xiàn)生長不良時，可以通過優(yōu)化培養(yǎng)環(huán)境、調(diào)整培養(yǎng)基配方、定期更換培養(yǎng)基、控制細胞密度、加強無菌操作以及使用商業(yè)化添加劑和設(shè)備等方法來解決問題。通過這些措施，可以有效地改善CHO細胞的生長狀態(tài)，提高藥物生產(chǎn)的效率和產(chǎn)品質(zhì)量。
蘇州阿爾法生物16年專注實驗室儀器設(shè)備、生物試劑、實驗耗材的供應(yīng)商。所提供的細胞系開發(fā)設(shè)備主要包括：單細胞測序儀、納米粒度儀、單細胞鋪板驗證儀，活細胞成像儀， iPSC基質(zhì)膠，細胞生長因子等。
