購買細(xì)胞收到細(xì)胞前，應(yīng)做哪些準(zhǔn)備工作？
購買細(xì)胞應(yīng)具有一定細(xì)胞培養(yǎng)知識與經(jīng)驗(yàn)，并具備基本實(shí)驗(yàn)設(shè)備，如細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室、超凈工作臺、CO2培養(yǎng)箱，倒置顯微鏡等；還應(yīng)準(zhǔn)備好相應(yīng)的細(xì)胞無菌培養(yǎng)基、血清、雙抗、細(xì)胞培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)板、移液管等。
購買的細(xì)胞收到細(xì)胞后，應(yīng)該怎么操作？
1. 觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請及時與技術(shù)支持聯(lián)系；
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)，隔天再取出進(jìn)行觀察；
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等；
4. 可將培養(yǎng)瓶內(nèi)多余的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管中，備用；細(xì)胞傳代時，可以將該培養(yǎng)基按照一定比例和自備的培養(yǎng)基混合使用，讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)培養(yǎng)條件；
5. 確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)良好后，應(yīng)及時將細(xì)胞凍存，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)，避免后期實(shí)驗(yàn)失誤可能發(fā)生細(xì)胞污染或死亡而導(dǎo)致的細(xì)胞丟失；
6. 建議收到細(xì)胞后前3天，100X、200X、400X各拍3-5張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和廠家技術(shù)支持溝通交流。
細(xì)胞發(fā)貨標(biāo)準(zhǔn)是什么？
細(xì)胞發(fā)貨時，保證細(xì)胞處于生長對數(shù)期；貼壁細(xì)胞達(dá)到75%以上匯合度，約5×10^5cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶；傳代次數(shù)5代以內(nèi)；凍存細(xì)胞發(fā)2個凍存管；無微生物污染。
細(xì)胞一般是以什么形式運(yùn)輸？
細(xì)胞通常用T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，發(fā)貨時用相應(yīng)的培養(yǎng)基灌滿細(xì)胞瓶，密封瓶口后放在包裝盒內(nèi)，以快遞的方式發(fā)送給客戶。天氣變冷，溫度低于4℃時，以凍存細(xì)胞,干冰運(yùn)輸?shù)姆绞桨l(fā)貨。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中，是否可以更換培養(yǎng)基？
不建議替換。每株細(xì)胞均有其特定使用且已適應(yīng)的培養(yǎng)基，而且經(jīng)過一定時間馴化后，若驟然改變培養(yǎng)條件，細(xì)胞有可能出現(xiàn)不適應(yīng)，表現(xiàn)出生長緩慢、顆粒增多、死細(xì)胞出現(xiàn)，造成細(xì)胞無法存活；也有些細(xì)胞在更換培養(yǎng)基后也能正常的生長，細(xì)胞狀態(tài)也能維持，但問題會出現(xiàn)在凍存后期的復(fù)蘇過程，有可能細(xì)胞沒法復(fù)蘇，所以不建議隨便更換培養(yǎng)基。
購買細(xì)胞后如何選擇細(xì)胞培養(yǎng)瓶？
一般，生長速度慢的細(xì)胞如果想要更漂亮的細(xì)胞狀態(tài)，那么采用塑料瓶會比玻璃瓶的效果好；生長速度快的細(xì)胞，用玻璃瓶培養(yǎng)的效果會更好。因此，對于同一種細(xì)胞，在其生長速度慢的時候（比如細(xì)胞剛復(fù)蘇時或者原代培養(yǎng)），塑料瓶會好一點(diǎn)；而在其生長旺盛的時候，玻璃瓶則相對會好一點(diǎn)。
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