什么是單克隆抗體？
單克隆抗體定義：
與靶抗原上的特定表位結(jié)合的一種（單一）抗體構(gòu)成單克隆抗體。
單克隆抗體生產(chǎn)
為了產(chǎn)生單克隆抗體，是將免疫原注射到宿主動(dòng)物中。一旦免疫原引起免疫反應(yīng)，脾臟中的 B 細(xì)胞就會(huì)被提取出來并與骨髓瘤細(xì)胞（癌細(xì)胞 B 細(xì)胞）融合。
健康的脾細(xì)胞不會(huì)在細(xì)胞培養(yǎng)中無限期地存活，因此進(jìn)行此融合過程以制造永生細(xì)胞系。通過該過程產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞系。
通過將脾臟中的單個(gè) B 細(xì)胞融合并培養(yǎng)到它們自己的雜交瘤中，產(chǎn)生了所有產(chǎn)生相同特異性抗體的 B 細(xì)胞的單一培養(yǎng)物。
B 細(xì)胞將單克隆抗體分泌到細(xì)胞培養(yǎng)基中。在這里，它們被提取出來進(jìn)行進(jìn)一步的測試和純化。
單克隆抗體雜交瘤克隆的產(chǎn)生提供了穩(wěn)定的可再生抗體來源，確保每批與前一批相同。
為了產(chǎn)生一種分泌富含抗體的液體（稱為腹水）的腫瘤，也可以將雜交瘤注射到小鼠的腹腔中。
單克隆抗體的用途：
檢測特定抗原
檢測蛋白質(zhì)家族的單個(gè)成員
在實(shí)驗(yàn)/批次之間創(chuàng)建一致的結(jié)果
對背景較少的細(xì)胞進(jìn)行染色——非常適合免疫組織化學(xué)、免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光實(shí)驗(yàn)
量化蛋白質(zhì)表達(dá)（例如流式細(xì)胞術(shù)或熒光激活細(xì)胞分選）
檢測分子構(gòu)象的變化
檢測磷酸化狀態(tài)的變化
檢測 X 射線晶體學(xué)的目標(biāo)
創(chuàng)建缺少特定細(xì)胞類型的動(dòng)物模型
免疫療法
單克隆抗體不適用于：
基于同源性檢測跨物種的靶蛋白
檢測低水平的目標(biāo)蛋白
檢測構(gòu)象改變的蛋白質(zhì)
| 多克隆 | 單克隆 |
| 具有不同抗原互補(bǔ)位的異質(zhì)抗體群 | 具有一個(gè)互補(bǔ)位的特異性抗體的同源群體 |
| 非表位特異性 | 表位特異性 |
| 與相似抗原發(fā)生交叉反應(yīng)的可能性增加 | 低交叉反應(yīng)性 |
| 背景噪音的可能性增加 | 低背景噪音 |
| 批次變異性 | 相同的批次 |
| 開發(fā)成本低 | 開發(fā)成本高 |
| 快速生產(chǎn)（約 3 個(gè)月） | 生產(chǎn)緩慢（約 6 個(gè)月） |
| 許多宿主物種選擇 | 很少有宿主物種選擇 |
什么是多克隆抗體？
多克隆抗體定義：
與靶抗原上許多不同表位結(jié)合的許多（多）不同抗體構(gòu)成多克隆抗體。
多克隆抗體生產(chǎn)
將免疫原注射到宿主動(dòng)物體內(nèi)以產(chǎn)生多克隆抗體。動(dòng)物中的免疫反應(yīng)是由這種免疫原激活多個(gè) B 細(xì)胞引起的，所有這些 B 細(xì)胞都針對免疫原上的特定表位。
大量具有不同互補(bǔ)位的抗體由此產(chǎn)生，因此對靶蛋白的親和力不同。
免疫后，可以直接從血清（去除凝血蛋白和紅細(xì)胞的血液）中使用這些多克隆抗體，或者將它們純化以獲得不含其他血清蛋白的溶液。
必須用抗原對新動(dòng)物進(jìn)行免疫以創(chuàng)建新批次，這意味著批次之間存在高度的可變性。
多克隆抗體的用途：
檢測具有高抗原同源性的已知或未知抗原亞型
檢測低水平的特定抗原
盡可能多地捕獲抗原（例如免疫沉淀或染色質(zhì)免疫沉淀）
檢測變性蛋白質(zhì)
檢測具有可能的遺傳多態(tài)性、糖基化或構(gòu)象變化的靶標(biāo)
跨多種檢測類型檢測天然蛋白質(zhì)
在不同 pH 值和鹽濃度的溶液中檢測目標(biāo)
多克隆抗體不適用于以下領(lǐng)域：
定量實(shí)驗(yàn)，例如流式細(xì)胞儀，由于多個(gè)結(jié)合位點(diǎn)導(dǎo)致信號(hào)放大，會(huì)導(dǎo)致不正確的結(jié)果
與高同源蛋白存在交叉反應(yīng)問題的情況
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