如果您*熟悉細(xì)胞培養(yǎng)，您可能聽說過 HEK293 細(xì)胞。HEK293 細(xì)胞新藥實驗室 較為常用的細(xì)胞系之一。但它們是什么？為什么要使用它們？“293" 是什么意思？與HEK293T 細(xì)胞相同嗎？請繼續(xù)閱讀這些問題的答案以及更多內(nèi)容。 一、什么是 HEK293 細(xì)胞？ HEK293 細(xì)胞是人類胚胎腎細(xì)胞，起初由荷蘭生物學(xué)家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分離和培養(yǎng)。Van der Eb 實驗室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 進行轉(zhuǎn)染 。這是他們的第 293 次實驗，所以就命名該細(xì)胞系為 HEK293 ，蓋細(xì)胞系的主要作用是通過細(xì)胞的基因改造實現(xiàn)重組蛋白合成。那么，HEK293T 細(xì)胞與HEK293是同一種細(xì)胞嗎？ 其實，并不*是，因為系HEK293T細(xì)胞的來源是將 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因組中——這意味著它們能夠從攜帶 SV40 復(fù)制起點的質(zhì)粒載體中產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)。  二、HEK 細(xì)胞有何優(yōu)點？ 使用 HEK293 細(xì)胞有很多優(yōu)點。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護的細(xì)胞系，分裂迅速，大約每 36 小時可以增長 1倍。培養(yǎng)的細(xì)胞既能用于瞬時和穩(wěn)定表達，也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng)，比較容易轉(zhuǎn)染，并且能夠產(chǎn)生大量的 重組蛋白。 目前，HEK293 細(xì)胞主要用于癌癥研究、新藥開發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。 三、 HEK293 細(xì)胞的分類 HEK293 細(xì)胞已被用于創(chuàng)建具有特定用途的各種衍生細(xì)胞系。 表 1：HEK293 細(xì)胞的一些常用衍生物。
HEK293 細(xì)胞生長對培養(yǎng)環(huán)境要求不高。一般情況下維持 37°C 和 5% CO 2的加濕培養(yǎng)箱及充足的培養(yǎng)基供應(yīng)即可滿足 ，為防止細(xì)菌感染，必要時可添加少許抗生素，比如：青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺等。細(xì)胞轉(zhuǎn)染方式可以建議使用HEK293 轉(zhuǎn)染試劑盒，操作方便、簡單。  五、HEK293 細(xì)胞培養(yǎng)注意事項 1.HEK293在進行傳代培養(yǎng)時，長期培養(yǎng)會導(dǎo)致細(xì)胞活力下降，所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過多，通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下，如果選擇的細(xì)胞系超過20代，需要需要解凍新的細(xì)胞重新開始。 2.實驗操作過程中需要注意無菌操作，避免支原體感染，同時做好定時檢測。 3.由于HEK293 細(xì)胞系的衍生物較多，所以培養(yǎng)時需要根據(jù)實驗選擇合適的細(xì)胞系進行培養(yǎng)。 蘇州阿爾法生物實驗器材有限公司13年專注于生物實驗室儀器設(shè)備與耗材的供應(yīng)，儀器設(shè)備涵蓋生物反應(yīng)器、發(fā)酵罐、細(xì)胞搖床、PCR儀、移液器、離心機等上百種品類試劑耗材包括：培養(yǎng)瓶、搖瓶、培養(yǎng)基、 HEK293細(xì)胞 、細(xì)胞培養(yǎng)試劑、細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒等細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)。如有更多問題可進入網(wǎng)站進行咨詢。 |
